1、如何对植物病害进行标本采集和鉴定?
园艺植物病害标本采集与制作
一、目的要求
学习采集、制作和初步鉴定植物病害标本的方法,了解当地园艺植物常见病害种类、症状特征和发生情况,为识别园艺植物病害,安全保存植物病害标本奠
定基础。
二、材料和用具
标本夹、标本纸、采集箱、锯子、剪刀、小刀、镊子、放大镜、塑料袋、铅笔、记录本、标签、体视显微镜、显微镜、载玻片、盖玻片、挑针、标本瓶、大烧杯、酒精灯、滴瓶及常用植物病害标本保存液等。
三、内容和方法
1.采集用具
(1)标本夹 主要用于夹压各种含水分不多的病害叶片标本,多为木制或铁制的栅状板。
(2)标本纸 应选用吸水力强的纸张,可较快吸除枝叶标本内的水分,要保持纸张干燥和清洁。
(3)采集箱 采集较大或易损坏的组织如果实、根、茎、块根、块茎以及在田间来不及压制的叶片标本。
(4)枝剪、小刀、放大镜、麻纸袋、塑料袋、记载本、标签等物品。
2.采集方法
(1)采集具有典型症状的病害标本,尽可能采集到不同时期、不同发病部位的标本。
(2)采集有病征的病害标本,以便进行病原物鉴定工作。真菌病害的病原一般有无性、有性两个阶段,应尽量在不同的时期分别采集。有些真菌的有性子实体常在地面的病残体上产生,也要注意采集。
(3)避免病原物混杂,采集时对病原物容易混杂、污染的标本,如锈病、黑粉病、白粉病等要分别用纸夹(包)好,以免观察病原物时发生差错。
(4)随采集随压制,或用湿布包好,防止变形、干燥卷缩,给标本制作造成困难。
(5)随采集随记载,记录的内容一般包括标本编号、寄主名称、病害名称、病害危害情况、采集地点、采集环境、采集日期、采集人等项目。标本应挂有标签,标签上的编号与同一份标本在记录本上的编号必须相符,以便查对。
(6)每种标本采集的数量不能太少,一般叶斑病类标本应在10张以上。
3.蜡叶标本的制作
对于含水量少的标本,应随采集随压制,以保持标本的原形;含水量多的标本,应自然散失一些水分后,再进行压制;有些标本制作时可适当加工,如标本的茎过粗或叶子过多,应先剪掉一部分再压制,防止标本因受压不匀,或叶片重叠而变形。有些全株性的标本,可将标本折成适当形状后再压制。压制标本也应附有标签。为避免压制的标本变形,并使植物组织中的水分易被标本纸吸收,标本夹好后,要用绳子将标本夹捆紧,放到干燥通风处。要注意勤换标本纸,使标本尽快干燥,以保持原有色泽,并可避免发霉变质。一般前4d每天早晚各换1次,以后每天更换1次,直至干燥为止。干燥后的标本移动时应十分小心,以防破碎。对于茎秆、枝条等粗大标本,可放在通风处自然干燥,但注意不要使其受挤压而变形。
标本经压制干燥后,需进行选择整理,并填写好标签一并放入蜡叶标本袋或蜡叶标本盒中保存,在标本袋或标本盒上也要贴上标签,然后按寄主或病原分类存放。存放时要避光照、潮湿、灰尘,防止虫蛀。
4.浸渍标本的制作
柔软多汁的果实、块茎、块根及肉质的菌类子实体,不适于干制,必须用浸渍液保存,以便保持标本的色泽和症状特征。浸渍液的配方很多,常根据浸制标本的色泽和浸制的目的进行选择。
(1)防腐浸渍液 ①5%福尔马林50ml,95%酒精300ml,水2000ml;②70%酒精;③5%福尔马林。此液用于防腐,而不要求保持原色。用于保存肉质果实、鳞茎、块根,也可用于保存肉质的高等菌类子实体。浸渍时应将标本洗净,使浸渍液淹没标本,若标本上浮,可用线将标本固定在玻片或玻棒上。若浸泡标本量大,浸泡数日后再换一次浸渍液。
(2)保持绿色浸渍液 ①醋酸铜液 将结晶的醋酸铜逐量加到50%的醋酸中,直到不溶解为止,配成饱和溶液,然后将饱和液稀释3~4倍后使用。先将稀释液加热至沸,投入标本。当标本原来的绿色被漂去,经3~4min,待绿色恢复后,即将标本取出,用清水洗净,然后保存于5%福尔马林液中,或压成干标本。此种方法保色能力较好,但标本必须煮过。棉铃、葡萄和番茄的果实等不能煮的标本就不能采用。②硫酸铜-亚硫酸浸渍液 将标本浸在5%的硫酸铜溶液中6~24h,取出用清水漂洗数小时,然后保存在亚硫酸溶液中。亚硫酸溶液的配制,可用含5%~6%二氧化硫的亚硫酸溶液15ml,加水1000ml,或以浓硫酸20ml,加在1000ml水中,然后加入亚硫酸钠16g即配成。这种方法适用于不能煮沸的棉铃、水果等。
(3)保存黄色和橘红色标本浸渍液 含叶黄素和胡萝卜素的果实如杏、梨、柿、黄苹果、橘桔或红辣椒等,用亚硫酸溶液保存为适宜。注意浓度不宜过高,因亚硫酸有漂白作用。浓度过低防腐力不够,影响保存,可加少量酒精。果实浸渍后如发现崩裂,可加少量甘油。
(4)保存红色浸渍液 红色标本中主要含有花青素,用瓦查(Vachs)的红色浸渍液较好。其配方为硝酸亚钴15g,氯化锡10g,福尔马林25ml,水2000ml。将洗净的标本完全浸没在上述溶液中,浸渍两星期后,取出保存在福尔马林10ml,亚硫酸饱和溶液30~50ml,95%酒精10ml,水1000ml的浸渍液中。标本瓶应加盖密封,并贴上标签。
园艺植物病害的病原物还可制成玻片标本永久保存,作为鉴定病害种类之用。
四、实训作业
1.每人采集、制作园艺植物病害蜡叶标本10~15件,制作浸渍标本1~2件。
2.每人写1份园艺植物病害标本采集制作的实训总结报告。
2、植物病害标本的采集要注意哪些事项?
采集时应注意的事项:1.确定采集时间和地点:根据昆虫的生态学特性而定,如小麦吸浆虫的成虫只有在小麦抽穗、扬花时才能采到,大豆食心虫的越冬幼虫及虫茧只有在土中才能采到;蜻蜓、蜂类等需在白天采集,蛾类等一般在夜间采集,等等。
2.个体完整、类型齐全:采集的标本应力求完整无损,以利于鉴定和保存;每一种个体应采集足够多的数量尤其是稀有种类;每种昆虫应尽可能采到各个虫态类型及雌、雄个体,有的还需采集多型现象的各型。
3.注意采集害虫的为害状以辅助鉴定:有些检疫性害虫的为害状或隐藏部分不便切取,可拍摄照片记录。
4.及时做好采集记录:标本应分类编号,记明采集时间、采集地点、采集人、寄主及环境状况等。寄主还应尽量记录品种、产地、路径地段、运输工具、包装材料及采集部位。有些颜色、环境状况难以记录的,最好现场拍摄彩色照片。
3、病害标本有哪些分类?
specimens of plant disease
许志刚
供教学示范、科学研究和学术交流或陈列展览的病植物或病原物。植物病害标本通常包括具典型症状的病植物、病原物的纯培养、病原物玻片标本或照片。完整的标本应注有正规的标签,标签是一个索引,能提供最重要的信息。病植物上的标签应记载:寄主名称(附拉丁学名)、病害名称、病原物名称(附拉丁学名)、采集地点、采集者、鉴定者、采集日期,备注栏内有病害症状的简要描述,发病场所的地理特点,以及其他必要的说明等,以便长期保存和使用。标本的种类很多,因植物和病原物种类的不同、保存的目的和用途、制作方法的差异而有很大的不同,常见的有蜡叶标本、浸渍标本、玻片标本、琼脂薄膜标本、菌种标本、活体标本、照片、幼灯片和录像等。
蜡叶标本
采集典型症状植物经脱水干燥和定型后,装在玻璃盒中,或固定在硬纸板上,贴上标签。蜡叶标本多限于植物的根、茎、叶、花、幼苗上的病害,较少用于果实病害压制。有的病害在植物不同生育阶段或不同部位表现不同的症状,应在不同时期或不同部位采集后进行压制。有些病害的病原物能侵害不同的寄主,并表现不同的症状,如梨锈菌在梨和转主寄主桧柏上为害的症状不同,应分别采集在各个寄主上不同阶段的标本。蜡叶标本的干燥工艺对标本质量有很大影响,传统的方法是将新鲜的标本夹在干燥的吸水纸中,经多次换纸逐步脱水。干燥的标本基本上仍保持原有色泽。也可用热砂或熨斗烫压的快速干燥方法,处理过的标本再夹在吸水纸中吸水1~2天即可。优点是能很快压平和干燥,缺点是温度过高常导致褪色或变色,绿色不易长久保存。保绿效果较好的是采用醋酸铜或硫酸铜浸渍法。将新鲜标本经浸渍处理后再压干,绿色可以经久不变。经干燥压制后的标本也可密封在特制的塑料膜内,更方便于保存,还可从正反面进行观察。
浸渍标本
对多汁的植物、果实或有瘤肿症状的植物,为了尽量保持病害的特征或原有色泽,必须浸泡在防腐液或保色液中。浸渍液以醋酸铜和亚硫酸液为多,视标本种类和保存要求而异。如单纯防腐的可用福尔马林酒精液(FAA),保持绿色用醋酸铜或硫酸铜溶液,保持黄色和桔红色用赫斯娄(Hesler)液和瓦查氏液等。浸渍标本常保存在盛满药剂的方形或圆柱形标本瓶中,瓶口要用石蜡密封,以防液体蒸发后标本干燥变质等。
玻片标本
有临时玻片和永久玻片两种。临时玻片一般以水、乳酚油或希尔液为浮载剂,将病原生物或病组织作徒手切片后挑制而成。临时玻片中的浮载剂易蒸发而干涸,不能持久,可在盖玻片边缘用指甲油或树脂密封,制成半永久玻片。永久玻片是将病材料或病原物的子实体制成石蜡切片,标本中的材料厚度均匀一致,经透明和染色后,不同的组织显示不同的色泽,对比度强,清晰易认,可保持数十年不变,有利于病原物鉴定或病理变化的研究。
菌种标本
病原生物的种类很多,实验室内保存的菌种都是经分离纯化后的纯培养物,绝大多数的病原细菌和病原真菌都可以在人工培养基上生长,可以在冰箱中保存,更多的是经冻干后在真空状态下的安瓿瓶中保存。大多数真菌在培养皿的琼脂平板上生长形成特定形态的菌落,再将其移放到玻璃纸片上,经蒸发干燥留下一层长有菌落的琼脂薄膜,装在清洁的纸袋中,与蜡叶标本一起保存。
活体标本
许多病害标本,在未充分认识或鉴定以前,应尽量保留活体标本。尤其是各种霜霉病,类菌原体等,一旦组织干枯死亡,这些专性寄生的病原物亦同时死亡,很难进一步分离鉴定。因此,采回的材料应尽量保持存活状态,必要时应不断地转移或接种到实验室或温室中栽培的草本寄主植物甚至试管苗上。少数病原真菌和细菌以及所有病毒,不能在培养基上生长,必须接种在寄主活体上才能保存其活力。寄生性种子植物的种子可密封在干燥的种子瓶内在低温下保存多年。
照片与录像
调查或采集中见到的主要病害植物和病原物在野外的生态环境,除用文字描述外,还可用照相机或摄像机拍摄下来,可以保存比肉眼观察更完整、细致、有真实感的形象。
病害传播
disease spread
赵美琦
病原物传播体从发病植株或位点向健康植株或位点的扩散蔓延过程。表现为病害随时间在空间分布的变化,即病害流行过程中传播距离和传播速度的动态变化规律。病害传播的量变规律,主要决定于病原物传播体的种类、生物学特性、数量及其传播方式和动力。病害传播规律的定量研究,主要针对气传病害,其他病害研究较少。
病害传播是一系列复杂的生物学过程和物理学过程,虽然以病原物传播体(见传播体)的传播为基础,又不等同。首先由孢子的形成和释放决定传播体的数量和质量。其扩散和着落决定孢子的物理传播,侵染和发病最终实现病害传播。因此,在病害传播距离的研究中提出了传播体的物理传播距离和病害传播距离的概念。由于孢子的气流传播规律几乎和非生物的空中微粒的气流传播规律一样,因此很早就有人引用气体动力学的理论和方法描述病原物传播体的物理传播距离。艾罗尔(D.E.Aylor,1978)研究了孢子释放率和孢子所受外力的关系。施罗特(H.Schr?dter,1960)提出了孢子飞散距离与上升气流、水平风速、沉降速度的关系及孢子随上升气流达到的最大高度。帕斯奎尔(F.Pasquill,1962)把描述空中微粒传播扩散规律的高斯烟缕模型(The Gaussian plume model)移植到病原物传播体的物理传播规律中来研究。但是,当一个病原物传播体被气流传到很远距离后,它能否萌发、侵染、以至造成病害流行后果,受一系列复杂因素制约。所以病原物的物理传播只是病害传播的前提,病害的传播距离实为病原物传播体的有效传播距离。
病害传播距离既受传播体的物理性状、气流运动规律的影响,也受传播体、寄主植物及其环境等有关生物因素影响。当一定量的孢子由菌源中心经传播发病后,新生病害的空间分布,一般是在菌源中心处病害密度最大,距离愈远,密度愈小,呈现一定梯度。这就是侵染梯度或病害梯度,可用清泽茂久和麦肯齐(D.R.Mac Kenzie,1979)建立的梯度模型,推求出反映病害传播到某一距离的概率(见病害梯度)。不同病害的传播梯度不同,其传播距离也不同。梯度愈缓,传播距离愈远;反之,则传播距离近。从梯度模型看,理论上只有当距离无限大时,病害密度才接近0。但实际上,病害传播距离是有限的,所以,在推求传播距离时,首先要根据病害种类和工作要求的精度确定病害“实查可得最低病情”,才能由梯度模型推出传播距离。在病害实际流行过程中,可通过人为控制孢子释放的时间,为此测量出病害的一次传播距离或一代传播距离(见传播距离)。
在病害的一次传播距离或一代传播距离中,菌源中心产生的病原物传播体受很短一段时间内单一方向风的作用,造成子代病害的扇形分布,有时可简化而看成单向的直线传播,自然界中这种传播结果较少见。更多的是在一段时间内,风向风速发生多次变化,造成传播后新生病害常呈圆形、椭圆形,甚至不规则形的分布。根据病害传播的实测数据研制各种空间动态模型,如小麦条锈病春季流行的直线传播、圆形传播、椭圆形传播的空间动态模型。还可将病害流行过程中的时空动态结合起来,建立时空一体的综合模型,可以预测病害传播距离,及推求病害传播速度、分析寄主相对抗病性和植株密度的影响及其田间发病图式。从而为病害流行预测和管理决策服务。
病害调查
plant disease survey
商鸿生
在病害发生现场收集有关病害的种类、分布、严重程度、为害状况及造成的损失以及相关环境要素的基本数据,用以阐明病害发生规律和为加强病害防治提供可靠依据。病害调查是重要的基础工作,它既是开展试验研究的前提,也是生产上制订防治策略前必须进行的基础工作。
调查类型病害调查分为基本调查(普查)和专题调查两大类型。基本调查以了解一定地理区域内各种植物或特定植物的病害种类、分布与损失程度为目的,所获得的资料用于编写病害志、绘制病害分布图和拟定防治规划。植物检疫性病害普查资料是划分疫区和保护区,确定或撤消检疫对象的重要依据。专题调查的对象和目的各不相同,多以具有重要经济意义的病害为调查对象、深入了解病害发生和防治中的关键问题。①病害发生规律调查。主要了解病害发生与环境条件、品种和栽培措施的关系,或病害流行关键阶段(越冬期、越夏期)的发病特点。有时通过多年多点调查了解病情发展的时间动态和空间动态,积累系统数据,用于建立数字模型。②测报调查。侧重收集菌量、病情和气象资料,用于建立预测式或依据已有的办法进行病害预测。③病害防治专题调查。是评价农药、品种、天敌以及综合措施的防治效果、效益和存在问题。④作物品种抗病性调查。主要了解田间品种的抗病性表现和变异情况。
调查原则
植物病害调查应遵循下述基本原则。①要有明确的调查目的和任务;②要有周密的调查方案,确定适宜的调查方法;③如实反映情况,防止主观片面;④控制调查的规模,尽量节约时间、人力和财力;⑤调查资料完整,配套,调查数据准确可靠并有代表性和可比性;⑥与田间试验和室内研究紧密结合,互相衔接。
调查方法
根据病害性质和调查目的,选择适宜的调查方法。常见调查方式有巡回调查和定点调查两类。前者适用于较大地理范围,多按既定的路线进行调查,有些病害测报调查,各年均按一定的路线巡回调查,以积累可比性的病情资料。定点调查是选择代表性田块,固定调查点或固定调查植株,按一定的时间间隔多次调查,以了解病情消长规律。此外,在测报调查和品种抗病性调查时,还在适于发病的地块,特设调查圃(观察圃),前者种植感病品种,以避免品种抗病性的干扰,获得真实的菌源和病情数据,后者则种植一套抗病品种,观察抗病性变异情况。
病害调查以发病现场的实查为主,辅以访问、座谈,查阅历史资料。除定点系统调查外,因时间和劳力的限制,多采用田间踏查和目测估计的方法,必要时取样细查计数。调查时间间隔和次数依调查目的而异,普查每5~10年一次,专题调查可不定期或定期进行。调查前要研究确定调查时期、次数、取样方法,选定发病率、病害严重度和侵染型的记载标准,印制调查表格,备好计数器、放大镜、望远镜、海拔仪、录音机、照相机等常用器具。对少数作物现已研制出半自动式或自动式田间病情数据收集器,可在调查人员监控下自行记录病情数据并输入电脑。遥感技术也已用于病情调查和损失估计。
病害流行动态
epidemic dynamic
肖悦岩
在一定的环境条件下,病害数量随时间和空间的消长。广义的病害流行动态包括病害种类(群落结构)随时间和空间的变化。主要研究病害流行中病害空间分布格局、数量消长速率及其变化规律,这些是植物病害流行学的核心问题,也是进行病害预测和防治决策的重要基础。
病害流行动态分为时间动态(见病害流行时间动态)和空间动态(见病害流行空间动态),两者是同一过程的两个侧面观。时间动态以时间为主要量纲,研究病害数量(X)随时间(t)而变的流行速率(△X/Δt)问题,涉及相应的曲线形式和各种描述公式。空间动态则以空间距离(d)为主要量纲,研究病害密度或数量随空间位置而变的病害梯度(△X/△d)、传播距离和传播速度及其变化规率。病害梯度和传播距离可以说是某一瞬间的空间格局,而传播速度又增加了时间维,成为传播距离在时间维上的变化率。上述这些概念的区分只是为了便于分析病害传播和流行才进行的简化。在客观的病害流行过程中,时空动态是平行并进,密不可分的。没有病害数量的增殖,就不可能实现病害的传播;没有有效的传播所导致的病区扩大,也就难以实现种群的继续增殖。然而,已有的研究和应用成果大多属于时间动态的范畴。虽然也有一些空间动态研究结果,但能实用的不多,时空动态综合研究则更少(M.J.Jeger,1983,P.Kampmeijer and J.C.Zadoks,1977,赵美琦等,1985)。
由于流行学是群体中病害的科学(J.E.Van der Plank,1963),病害流行动态也立足于群体水平的研究,深入分析时要以个体水平的侵染过程和侵染循环为基础,发展一些新的定量概念和参数,如侵染概率、显症率、越冬、越夏期病菌存活率、病斑扩展速率、产孢量、孢子着落率等等。流行动态的重要参数——流行速率正是这些参数在群体水平上的综合。病害流行动态与侵染过程的关系如图所示。流行动态研究的规模向宏观方向发展达到群落水平,涉及病害种类的演替或演化、地理分布等,时空跨度更大。
季节流行动态与侵染过程的关系按照系统论的观点,植物病害是农业生态系统或农田生态系统的一个组成成分。病害流行动态是由整个系统结构决定的并且体现系统某方面的功能。病害流行动态规律研究中最重要的是明确病害系统内部结构和外部影响因素及其作用,解析和综合的方法同样重要。无论时间还是空间动态的研究都要建立速率与有关因子的联系,涉及选择哪些主导因子和建立何种形式的关系式。
随着流行学的不断发展,病害流行动态已经进入定量研究阶段。它以病原物、病害和环境的系统定量监测为基础(见病害监测)。1963年范德普朗克(J.E.Van dar Plank)首次用逻辑斯蒂模型描述病害流行动态(见逻辑斯蒂方程),1969年瓦格纳和霍斯福尔(P.E.Waggoner and J.G.Horsfall)首次报道了用于番茄早疫病的模拟模型——EPIDEM。近期的研究侧重以病害流行动态定量模拟为轴心,组合损失估计、防治效果模型和作物生长模型构成病害管理系统。流行动态的预测由短期、中期向长期乃至超长期发展。
参考书目
曾士迈、杨演:《植物病害流行学》,农业出版社,北京,1986.
Zadoks,J.C.and R.D.Schein,Epidemiology and Plant Disease Management,New York,1979.
病害流行监测
epidemics monitoring
曾士迈
对病害流行实况进行全面、持续、定性和定量的观测记载,简称监测。目的在于掌握病害流行及其影响因素的动态变化,为生产上提供病害预测和防治决策的可靠依据,为科学研究提供流行规律和预测方法的研究资料。将病害防治看成是系统管理,在一定的防治目标下,防治决策是管理的核心,预测是决策的基础,实况监测是预测和决策的依据。没有大量合格的数据资料,预测方法的研制和防治决策研究均无从下手。农田生态系统及其植物病害系统仍在不断演化,流行规律认识的深化和预测方法的提高需要坚持病害监测工作。监测的内容包括病情(病害数量或程度)监测、病原物发育进度和种群数量监测、病原物生理小种监测、传病介体监测、作物监测和环境监测。监测的方法因内容项目而异,但共同要求是保证准确,力求简便。有些特殊项目需要专门的技术和仪器设备。
病害流行监测与系统观察的区别
系统观察是针对固定田地或其样点每隔一定日数进行一次发病数量或密度的调查,掌握病害数量因时而变的动态,其对象往往限于某一种病害或病害本身。目前病害系统观察已成为农田有害生物(病、虫、草、鼠)“系统监测”的一个重要组成部分。监测是以几种主要病害的系统调查为中心,同时对有关气象因素、栽培条件、寄主状况进行全面的系统调查,还要取得与本地病害流行有关的外地病害信息。对有些病害还要增设项目,例如对存在有生理小种的病原物须了解其小种组成,对虫传病毒病害需调查传毒介体的种群动态和带毒率,针对某些农药还要进行病菌抗药性的监测,等等。总之,对“病害系统”的组分同步进行全面持续的调查,监测的对象是整个“病害系统”,而并非某种病害病情的时序数据。所以,“系统监测”中的“系统”不是通常用语“系统调查”中一般含义,而是系统科学的科学术语“系统”所具的含义。这种系统监测,获得的信息才能满足预测和决策的需要。
服务于生产和服务于研究的监测,基本原则和内容是一致的,但具体作法和要求有所不同。服务于生产的,要简便实用,只要能满足当地当时预测决策所需,项目不宜过多、作法力避繁难;服务于研究的,项目需全面细致,数据质量要求较高,以利于深化规律认识提高预测方法。需力求作法经济可行,以最少的人力物力取得最多的信息。两者绝不可割裂,力求结合起来,尽可能作到一举两得、同一数据可两用,或求同存异而信息能相互转换。不论为生产服务还是为研究服务,系统监测工作必须持久稳定,包括组织、制度和技术方法的相对稳定。与气象工作系统一样,没有长期、大量、规格一致的可靠数据资料,要认清规律和提高预测水平是不可想象的。监测工作在起步阶段,甚少效益,但坚持越久,它的作用会越大。从发展看,农田有害生物系统监测将逐步发展到气象观测工作那样的高度。
病情监测
指病情(病害发生程度或数量)的定期连续调查。每次调查进行病情估计,或针对一定面积进行目测估计,或通过抽样,计数,对整体进行估计。病情估计是流行学研究的基石,没有病情定量方法和数据,就没有定量流行学,也就难以进行病害预测、品种抗病性鉴定、药效测定和防治效果测定。
病情估计
流行学中既重要又很难作好的工作之一。病情通常用病害的普遍率、严重度和病情指数表达。普遍率是发病的植物体单元数占植物体单元调查总数的百分率。植物体单元可以是植株、茎、叶、果、穗等,相应的普遍率实为病株率、病茎率、病叶率、病果率、病穗率等。普遍率说明病害发生的普遍程度。严重度是发病的植物单元上发病面积或体积占该单元总面积或总体积的百分率,说明病害发生的严重程度。普遍率和严重度结合,全面说明病害发生的程度。病情指数是上述两者的乘积,或各级严重度的加权平均。实际是植物群体(包括发病的和无病的)的平均严重度。病情指数一般计算方法如下:
当严重度为一个平均值时,普遍率和严重度取值形式均为0.00~1.00的小数:
DI(病情指数)=I(普遍率)·S(严重度)
当分别调查各单元严重度级值时,严重度用级值0、1、2、3…整数,普遍率仍用小数:
上式中,Xi为各级严重度的调查单元数,ai为各级级值,amax为最高级值。
(计算时百分数均化作小数,0-1)
严重度分级
因病害类型有所不同。局部病害以受害器官为调查单元,最常见的叶斑病类以叶片为调查单元,每叶按其上病斑面积占叶片总面积的百分数分级,如麦类锈病的0、1、2.5、5、10、25、40、65、100%。系统病害或虽为局部病害而以单株为调查单元时,按全株症状严重度分成几级,分别赋以级值a=0、1、2、3…amax,共分几级依病害种类和工作需要而异,一般分成4~6级。近年来,为便于利用计算机数据存储和加工,不论调查单元是叶、果、枝,还是全株,严重度一概分为9级,加上无病的、由轻到重给以0、1、2、3、4…9十个级值。为统一标准、便于信息交流,对许多常见病害逐步形成一些严重度分级的标准图谱。在有些病害中病斑可以密集连片,严重度可以真正达到100%,而有些病害如小麦叶锈病则百分制严重度的给定数值往往大于其真值,其严重度分级图谱上标为100%的病叶,其孢子堆面积总和不过占叶片面积的37%(Madden,1991)。因为每个孢子堆四周占有一圈不产孢的面积,即使病害严重到极点也不会叶片全面布满孢子堆。严重度如何分级、分几级,要根据病情数据的用途兼顾合理性和实用性,既要保证必要的精确度又要易于迅速目测定级。分级过少过粗则结果不够精确,过多过细,则级差很小,不易迅速目测定级。调查数据如仅用于比较病情轻重或分析病情发展,在严重度较高的范围中不必分级过细,特别是多循环、局部病害其病情发展是对数级数、而不是算术等差级数发展的。但如果关键期(指对损失估计而言)病情数据将用于损失估计,则病情分级需兼顾病情级别和损失程度大体吻合,力求两者间呈一定函数关系。此外,严重度分级还要大体符合人的目测敏感度的差别。
韦伯-费赫纳定律
Weber-Fechner law
关于目测敏感度的定律。霍斯福尔和巴拉特(Horsfall and Barrat,1945)指出,严重度分级应当按照韦伯-费赫纳定律制定。该定律指出:在目测中,肉眼对讯号刺激的敏感度与刺激强度的对数成正比。由于人们在病组织占全面积的50%以下时注意的是病组织,而在50%以上时注意的是健康组织。因此,在50%以下的严重度应分为25%,12%,6%,3%等几级,而50%以上则分为75%、88%、94%、97%几级。这种分法有人称之为HB system。HB系统的前半段恰好吻合病害的指数增长,而后半段又近似病害增长的自我抑制现象。因此,当用于研究病害数量增长时,HB系统是合理易行的。如用于损失估计,最高两级无需分得过细,因为严重度为94%或97%的产量损失无甚差别。
普遍率和严重度的关系
是具实用意义的问题。在田间调查中,普遍率轻易调查,误差较小,严重度较难调查,误差较大。在一定条件下,普遍率和严重度之间存在一定关系。大多数叶斑病,单个病斑发病后面积扩展有限,普遍率和严重度主要由侵染位点数量决定,在流行前期和中期、普遍率接近饱和前,普遍率I和严重度S之间呈正函关系,简称I-S关系。可以简化田间调查,只调查普遍率,然后根据普遍率推算严重度。卡姆贝尔等(Campbell et al.,1990)提出如下三种情况下的理论通式:
当普遍率很低时,病斑分布为随机分布(卜哇生分布),则
式中:M为植物调查单元上可能发生病斑数的极大值。
当普遍率较高时,病斑可能呈二项式分布,病斑常集团产生,则
式中:b为每一病斑集团的病斑数除以每植物调查单元可能发生的病斑数的极大值。
如病斑呈负二项式分布,则:
上式中,M的定义同(1)式,k为负二项式的聚集度参数。
上列三式中的M、k、b参量取值均因病害种类而异,需通过多年多点的实地调查而测定。也可以在大量实测值的统计基础上求出经验式的预测式。但不论用理论式还是经验式,当普遍率接近饱和时,不能再从普遍率推算严重度。
病原物监测
对病原物发育进度和数量发展的定期连续调查。预测预报中需要监测病原物的发育进度,如子囊壳成熟进度可以作为小麦赤霉病、梨黑星病等病害中短期预测的依据。更重要的是病原物的种群数量。病原物种群数量的估测技术难度颇大。除线虫、高等寄生植物外,病毒、细菌体形微小无法目测,真菌群体的“个体”计数单元也无从划定,虽然菌核和孢子可以计数而菌丝体的生物量和繁殖潜能却难以测定。在多数情况下,一定空间范围内病原物群体的绝对量,包括生物量和个体数量,是无法测定和难以估计的,即便理论上可以想出方法,在实际上不能实行。实际上是对传播体的相对数量的变化进行监测,用于对病害流行系统作不同时空条件下的比较,或用作特定条件下病原物群体绝对数量的一个代表值。空中孢子捕捉和土壤带菌量测定等都属于这种性质。
空中孢子密度和土壤病原物的定量定测气传病害流行始期或其以前空中孢子密度是预测预报的重要依据。孢子捕捉方法有多种:最简单的如凡士林玻片法或培养基平面法以承接空中沉降的孢子;还有旋转胶棒孢子捕捉器(rotor-rod sampler)等。土壤病原物传播体能目测或镜检计数的,如菌核、线虫、真菌孢子等,可取土样直接计数;不能直接计数的,需选用选择性培养基进行定量分离(
4、植物病害标本的采集有哪些方法?
振落法:对于有假死性的昆虫(金龟子、象鼻虫、麦叶蜂等)可振动植株,使昆虫装死坠地再行采集。此法如配以采集伞、方布单等效果更好。
观察法:田间采集昆虫时,有时不能直接看到昆虫,但可根据虫鸣声、虫粪、为害状、天敌活动状等寻踪觅迹,捕捉到昆虫。
搜索法:某些昆虫善于隐蔽,采集时注意翻动石块、落叶,搜索树皮缝、土缝等处,常可采集到许多此类昆虫以至一些稀有种类。
诱集法:是利用不同种类昆虫的趋光性、趋化性、隐蔽性等习性而分别用灯光(黑光灯等)诱集、糖醋液等食物诱集、各种性诱剂诱集、谷草把(杨树枝把)等诱集昆虫。
5、植物病害标本要怎样采集?
植物病害标本的采集、制作和保存(包括杂草和植物被害状标本):(一)采集工具:采集植物病害(包括杂草及害虫的植物被害状)标本需要适当的工具,如采集箱、标本夹、吸水纸、修枝剪、小刀、手锯、小铲、纸袋、塑料袋、放大镜、采集标签、记录本、铅笔等。
(二)采集方法及注意事项:1.症状要典型:首先,所采集的标本应有典型的病状和病征;其次,最好采集到不同部位和不同生育期的标本,以使人们对病害有全面的认识。
2.避免混杂:每种标本上的病害种类应力求单纯,一个标本上有多种病害症状的一般来说采集价值不大;同时,各种病害标本应单独分装于不同的纸袋(塑料袋或小瓶)中,以免散落的病原物(各种霉层、粉状物等)相互混杂、玷污、影响鉴定的准确性。
3.寄主鉴定要准确:植物病害依附寄主而存在,尤其专性寄生的白粉菌、锈菌、病毒等引起的病害,离开寄主很难鉴定。因此,采集时必须正确鉴定寄主植物的种类;对于不认识的植物,应同时采集枝、叶、花、果实和种子,带回查证或送请专家鉴定。
4.有转主寄生现象的病害(梨锈病等),应在不同时期采集两类不同寄主的标本(含转主寄主的标本):许多病害有多种寄主植物,采集时也尽可能采到所见的不同寄主上的标本。同时,每种病害标本采集的数目不可过少,一般不少于10片病叶、10个病果或10根病根(茎),以备鉴定或制作时损坏或交换。
5.采标本:适于干制的标本,应随采随压于标本夹中;对容易干燥卷缩的标本(如水稻、小麦的叶片),最好立即夹在厚书本中,否则叶片失水卷缩后难以展平。一般不易损坏变形的寄主枝干或木质蕈体,剪、锯下来后可包于纸袋中或盛于采集箱内。柔软多汁的烂果、肉质蕈,应先用吸水纸包裹,再盛于采集箱中,并且不能装得太多,以免挤坏和相互污染。
6.记录:采集时,应及时记录采集地点、时间、寄主名称、发病情况、环境条件和采集人姓名等情况。有些有色标本难以记录或易变色的,最好当时摄下彩色照片。
6、如何对植物病害进行标本采集和鉴定
通过采集和制作标本,了解植物病害标本采集要求,学会标本的采集与记录,掌握植物病害标本的制作方法,进一步巩固病害知识,每人抽签完成1份病害标本。
材料和用具 标本夹、吸水纸、塑料袋、纸袋、标签、铅笔、记号笔、小刀、枝剪、手锯、标本缸、酵酸铜、硫酸铜、95%乙醇、甲醛溶液、亚硫酸、甘油、蒸馏水等。
内容与方法
(一) 病害标本的采集
1 标本采集基本要求
采集完整的标本,最好是先摄影然后再压制或浸渍保存,拍照越清晰越好,要求拍正常植株和病害部位。每号标本,样本数量应至少采集2-3份。
2 取样部位
(1)标本上有子实体的应尽量在老叶上采集
因为它比较成熟,许多真菌有性阶段的子实体都在枯死的枝叶上出现,而无性阶段子实体大多在活体上可以找到。
(2)柔软多汁的子实体或果实材料,则应采集新发病的幼果。
(3)病毒病应尽量采集顶梢与新叶。
(4)线虫病害标本应采病变组织,为害根部的线虫病害标本除采集病根外还应采集根围土壤。
(5)表现蔫萎的植株要连根挖出,有时还要连同根际的土壤等一同采集。
(6)对于粗大的树枝和植株,则宜削取一片或割取一截。
(7)如果病害在叶、果实和枝干上都有表现时,尽量采集全面。
(8)寄生类应和寄主一起采集。病害症状很特殊病害,要连同植株的枝叶或花一起采集,以便鉴、定其寄主名称。
3 标本数据记录和标本编号
要求记录准确、简要、完整。完整的记录与标签同样十分重要,要有寄主名称、
采集日期与地点、采集者姓名、生态条件和土壤条件等。
4 标本采集 方法
(1)枝干类、根部病害标本的采集
取其得病部位,用锯、枝剪或高枝剪采取,切勿用手折断,影响标本的美观,对纤维长而强韧的枝干等,尤应注意。
(2) 叶部病害标本的采集
大型叶植物,它们的叶子和花序均很大,采集标本时可采一部分或分段采集,以同株上幼小叶加上花果组成一份标本(同时标明叶实际大小);或把叶、叶柄各自分段取其一部分;
对于像菟丝子、列当这样的寄生植物应连同寄主一起采集,并记录寄主的名称。 (3)肉质或多汁植物(花、果实)病害标本的采集
应将其纵切或横切,有时需将其内部的组织挖出,还要考虑是否将一半的材料浸泡在保存液中保存。在野外干燥时,要在切开的茎表面洒大量食盐,用盐包裹的材料应置于夹有多层报纸的标本夹中,24小时后要把浸有盐水的报纸移去,或者用开水将材料烫死,然后放置在薄纸板-铝板的三明治层中烘干。
(二)病害标本的制作
从田间采回的标本,除一部分用作分离鉴定外,对于典型的病害症状最好是先摄影然后再压制或浸渍保存。压制或浸渍的标本尽可能保持其原有性状,微小的标本可以制成玻片,如双层玻片、凹穴玻片或用其它小玻管小袋收藏。
(三) 病害标本的保存
1 干燥法 适用于一般含水较少的茎、叶等病害标本的制作,最简单、最经济、应用最广。 将采集的标本夹在吸水纸中,同时放入写有采集地点、日期和寄主名称的标签,再用标本夹压紧后日晒或加温烘烤,使其干燥,干燥愈快愈能保持原有的色泽,标本质量亦愈高。夏季采的标本在温湿度高的情况下,容易发霉变色,换纸宜勤,通常在压制的最初三、四天每天换纸l-2次(视标本含水多少,及温湿度情况而定),以后每二、三天换一次,至完全干燥为止。在第一次换纸的同时,应将标本加以整理,因经初步干燥,标本变软易于铺展。烟草、蚕豆、梨、马铃薯的茎叶等很易发黑变色,都是很难保存颜色的标本,在制作过程中特别要注意快速干燥。需要保持绿色的干制标本,可先将标本在2-4%硫酸铜溶液中浸24小时,或经过醋酸铜溶液(配方及方法见浸渍法中醋酸铜的浸渍法)处理后再压制。也可以在叶面抹一层液体石蜡后再压,可以保持鲜绿色2-3天。
2 浸渍法 适用于 多汁的病害标本,
如果实、块根或担子菌的子实体等,必须用浸渍法保存。浸渍液体种类很多,有纯属防腐性的,亦兼有保持标本原色的,现介绍数种常用及效果较好的方法。
(1)防腐浸渍法:此类浸渍法仅能防腐而没有保色作用,如萝卜、甘薯等,不要求保色的标本,洗净后直接浸于以下溶液中。 ①5%福尔马林浸渍液。
②亚硫酸浸渍液:l000ml水中加5%-6%亚硫酸15ml(一般市售的亚硫酸含量为5— 6%)或用亚硫酸钠10.5g,浓硫酸8ml,水500ml配成混合液。
(2)保持绿色标本的浸渍液及浸泡法:
①醋酸铜保(绿)色浸渍法:往50%的醋酸中逐渐加入醋酸铜结晶溶解至饱和作为母 液(大约1000ml50%的醋酸中加入l5g醋酸铜即可达饱和),使用时兑水稀释1-4倍(稀 释倍数视标本颜色而异,色深者稀释倍数可小些)。将此液加热煮沸,投入标本,开始时标本的绿色被漂去,再经数分钟后标本又恢复绿色,此时立即将标本取出,用清水洗净,保存于5%的福尔马林溶液中,此法称为热处理。冷处理的办法是将标本置于上述稀释液中浸3小时后标本退色,再经72小时后标本恢复绿色,此时将标本取出,取水冲净,保存于5%的福尔马林溶液中。此法保持色泽时间较长,其保色原理大致是铜离子与叶绿素中的镁离子发生置换作用。所以,溶液经多次处理标本后,铜离子会逐渐减少。如要继续使用,应补入适量的醋酸铜。此法保存标本往往略带蓝色,与植物标本原色稍有出入。
②硫酸铜保(绿)色浸渍法:用清水冲洗标本,直接浸泡在5%的硫酸铜溶液中1—7天,待标本略带褐色时取出用清水漂洗,去除标本表面多余的硫酸铜溶液,然后保存在亚硫酸浸渍液中。
③保存黄色和桔红色标本的浸渍液:保存杏、梨、柿、红辣椒等果实标本用亚硫酸浸
渍液,亚硫酸浸渍液有漂白作用,因此使用时要注意浓度,一般用1 %即可(浸杏时浓度可再稀些),因浓度太小,防腐力不够,可加入适量酒精。为了防止果实崩裂,可加入少许甘油。
④保存红色标本的浸渍液:保存标本红色较难,因为红色是水溶性的花青素,很难保存。常用Hesler浸渍液保存,成分是:氯化锌50g,福尔马林25ml,甘油25ml,水1000ml。 将氯化锌溶于热水中,加入福尔马林,如有沉淀,用其澄清液。此溶液适用于由于花青素 而显红色的标本,如苹果、番茄等。
(四) 标本的保存
制成的标本,经过整理和登记,然后依一定的系统排列和保藏。
菌类标本一般按分类系统排列,要有两套索引卡片,一套是寄主索引,一套是菌类索引,以便于寻拽和整理。
标本室(柜)要保持干燥、潸浩,并要定期施药以防虫蛀与霉变。
1 标本盒保藏 教学和示范用的干制病害标本,采用玻面纸盒保藏比较方便,玻面纸盒,的适宜大小为20×28×2 cm。纸盒中先铺一层棉花,并在棉花中加少许樟脑粉以驱虫。最后在棉花上放上标本和标签。
2 标本瓶保藏 浸渍的标本放在标本瓶内保藏,为了防止标本下沉和上浮,可绑在玻璃条上然后再放入标本瓶。标本瓶的口盖好后滴加石蜡封口,然后贴上标签。
3 纸套内保藏 用牛皮纸叠成15×33cm的纸套,大量保存的干制标本,大多采用纸套保藏,将标本装入纸套内,并在纸套上贴好标签,放在标本柜中即可。
7、植物病害的浸渍标本要怎样制作?
浸渍标本的制作和百保存:多汁的果实、块根、块茎、鳞茎等病害标本及柔嫩肉质的子囊菌度和担子菌子实体,不宜制成干标本保存,需用浸渍液泡制在标本瓶中。浸渍液的种类很多知,主要作用是防腐。有些标本需要漂白,道使病原物与植物组织分色;有些标本则要求保持原色,需配制特殊的浸回渍液。
由于浸渍液都是答防腐剂,因此制作和保存常是同一种药液。
8、怎样做植物标本 【最有创意的】
植物学做标本的时候都这样做的
(一)准备
采集前应先收集有关采集地的自然环境及社会状况方面的资料,以便周密安排采集工作。同时应准备采集必需的用品,主要有:标本夹(45×30cm方格板2块,配以绳带)、标本纸(吸水性强的草纸,折成略小于标本夹的3~5张一叠若干)、采集袋(塑料袋)、枝剪、标签、野外记录纸、照相机等....
种子植物标本的采集和制作
(一)采集标本的要求
1.标本单株选择
从同种众多单株中,应选择生长正常,无病虫害,具该种典型特征的植株作为采集对象。力求有花有果(裸子植物有球花、球果)及种子。
草本植物要挖出根,植株高的可以反复折叠或取代表性的上、中、下3段。一次采不全,应记下目标,以备下次再采。
如果是供教学、科研用的标本就要精细一些了。即使是同一种植物,也要考虑不同的环境下产生的不同的个体。比如说同一种植物会有的异性叶(比如构树就有缺刻状分裂的和心状卵形的两种不同形态的叶片)、雌雄异株等等都要做成不同的标本以便于教学示范。
2.采集步骤
按预定目标,选择合要求的单株,剪取具代表性枝条25~30cm(中部偏上枝条为宜),依次完成下列步骤:
(1)初步修整。如去掉部分枝、叶,留下分枝及叶柄一部分。
(2)挂上标签,填上编号等(一律用铅笔。下同)。标准的采集签应包括采集号
采集时间、年 月 日、采集者、采集地点。
(3)填写野外记录。注意与标签编号一致,标准的野外记录应包括采集号
采集时间、年 月 日、采集者、采集地点、海拔高度、树高、胸高直径、树皮、树枝
叶、花、果、习性、生态环境、用途、俗名、正名、学名、科名、备考。当然实际操作也未必要填这么多的,可以根据情况酌情填写。
(4)暂放塑料采集袋中,待到一定量时,集中压于标本夹中。
(5)采集中应注意同株至少采两份,用相同的采集号标记。如有的植物需要开花结果后再采,应记下所选单株座标方位,留以标记。同种不同地点的植物应另行编号。散落物(叶、种子、苞片等)装另备小纸袋中,并与所属枝条同号记载,影像记录与枝条所属单株同号记载。有些不便压在标本夹中的肉质叶、大型果、树皮等可另放,但注意均应挂签,编号与枝相同。
(6)注意有毒性、易过敏种类。如蝎子草、漆树等,应慎重。大戟科、毛艮科等等都是比较有名的毒科。当然,在野外也不要乱尝试没吃过的植物。
(7)注意爱护资源,尤其是稀有种类。这个不用多说了吧,破坏环境和资源可不好。
(二)腊叶标本的压制与装帧
压制是标本在短时间内脱水干燥,使其形态与颜色得以固定。标本制作是将压制好的标本装订在台纸上,即为长期保存的腊叶标本。压制与制作标本须注意以下各点:
1.顺其自然,稍加摆布,使标本各部,尤其是叶的正背面均有展现。可以再度取舍修整,但要注意保持其特征。
2.叶易脱落的种,先以少量食盐沸水浸0.5~1分钟,再以75% 酒精浸泡,待稍风干后再压。
3.及时更换吸水纸。采集当天应换干纸2次,以后视情况可以相应减少。换纸后放置通风、透光、温暖处。捆绑标本夹时,松紧要适度,过紧易变黑,过松不易干。标本间夹纸以平整为准。如球果、枝刺处可多夹些。换下的潮湿纸及时晾干或烘干,备用。
标本压制干燥后即可装订,装订前应消毒和做最后定形修整,然后缝合在台纸上(30~40cm重磅白版纸)。将野外记录贴左上方,定名签填好贴右下角,此签不得随意改动。对定名签鉴定的名称有异议,可另附临时定名签。照片、散落物小袋等贴在另角。贴时均不要用浆糊,以防霉变。标本布局应注意匀称均衡、自然。装订后的标本再经过消毒,夹纸或装入塑料袋保存于专门的标本柜中。
缝合的时候一般取一些茎或枝,用线固定在白版纸上,叶子就要粘贴了(我们是用毛笔蘸白胶涂在叶子背面粘贴)。原则是叶片之间尽量不重合。谈谈本人的经验,粘羽状复叶的时候建议从上往下粘,因为可以保证叶片不重合,如从下往上很可能贴到中段两片叶子的角度就近乎0度了,再下去就要重合了。当然,我们博物组比较讲究标本的美观,所以在装订和整形上还是比较注意植株在白版纸上排一个怎样的形状比较好看。
9、植物病害的干标本要怎样制作?
干标本的制作方法:将所采集的标本分层压在标本夹的吸水纸间,每隔3~4张吸水纸平铺一层标本(勿重叠),以吸去标本中的水分。每个标本夹的总厚度以10厘米左右为宜,太厚不利于标本的干燥。为使标本尽快干燥且不变色发霉,应勤换纸、勤翻晒。夏季高温高湿的条件下,开始时的3~4天每天换纸1~2次,以后每2~3天换1次,直至标本完全干燥;春、秋季可适当减少换纸次数。
在第一次换纸时,因标本脱去部分水分而变软,易于铺展,应乘机整理标本形状,使其美观和便于观察。每一次换上的纸都应是干纸,换下的湿纸应马上烘干;直接接触标本的上下两面吸水纸易发霉沾污且沾附有检疫性病害的病原物,故应彻底焚毁处理,以防止在不经意间使检疫性病害的病原物扩散传播为害。在标本夹放置过程中不要受到挤压磨蹭,否则病害标本表面的病征会被磨掉而影响标本的鉴定。标本夹内的每号标本都需附有采集标签或与记录本上相对应的编号牌,每次换纸时均需注意,不要搞错或失落。
幼嫩多汁的幼苗、花等标本,可先夹在两层脱脂棉中,然后在标本夹中压制。
含水量高的标本,也可先在烘箱中烘干(温度控制在35~40摄氏度之间),但换纸要更勤,至少2小时换1次。易变色的叶片(如烟草、马铃薯、蚕豆、梨等的叶片)标本,可平放在阳光直射的热沙中使其快速干燥,能保持原色。枝干或木质蕈类,只需在通风干燥处晾干或在日光下晒干。
10、植物病害标本的采集伞有哪些作用?
采集伞(用于采集具有假死性及不善飞跳的昆虫)、吸虫管(用于采集蚜虫、小蠹虫等微小昆虫)、活虫采集盒(方形或圆形,铁皮或铝皮制成,上有铁纱或铜纱透气孔)、诱虫灯(黑光灯、频振灯或普通灯泡为光源以诱集有趋光性昆虫)、诱蛾器(一般配有糖醋液用来诱集有趋化性昆虫)、暂时保存昆虫的三角纸袋和棉花包、放大镜、小刀、镊子、剪子、指形管、记录本、笔等。